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淺述成像流式細胞儀工作的具體過(guò)程

更新時(shí)間:2022-08-11      點(diǎn)擊次數:1285
  成像流式細胞儀是將待測細胞或微粒進(jìn)行熒光染色后制成懸液標本,在一定氣體壓力下將待測樣品壓入流動(dòng)室,用不含細胞或微粒的緩沖液(又稱(chēng)鞘液)在高壓下從鞘液管?chē)姵?鞘液管入口方向與待測細胞或微粒流成一定角度,使鞘液包繞著(zhù)細胞或微粒高速流動(dòng),形成一個(gè)圓形的流束(即鞘流),待測細胞在鞘液的包裹下單行排列,依次通過(guò)流式細胞儀的檢測區域,經(jīng)激發(fā)光激發(fā)后產(chǎn)生熒光信號。
  成像流式細胞儀工作過(guò)程:
  開(kāi)始使用流式細胞儀,第一步是準備要分析的樣品。從細胞培養物,血液或分解的組織中獲得的細胞應制成懸浮液。將該細胞懸浮液分成數個(gè)試管進(jìn)行染色,保留未染色細胞作為對照。通過(guò)添加標記有熒光探針的抗體或染色細胞成分的染料對其他細胞樣品染色。分析細胞內蛋白質(zhì)時(shí),首先必須將細胞固定(使用福爾馬林緩沖液)并進(jìn)行透化(使用透化劑),以使抗體和染料進(jìn)入細胞。細胞與抗體或染料孵育后,將細胞在緩沖液中洗滌,然后重懸在基于鹽的緩沖液中進(jìn)行分析。然后將準備好的樣品引入流式細胞儀。
  成像流式細胞儀有三個(gè)主要組成部分:液流系統,光學(xué)系統和電子系統。在流式細胞儀的中心部分,流通池中樣品材料遇到激發(fā)光并散射光,隨后該光被檢測系統讀取和記錄。既具備流式細胞術(shù)的速度、靈敏度和分型能力,也具備顯微鏡的清晰圖像和有效洞察力功能。
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